簡(jiǎn)述垂直轉(zhuǎn)印電泳槽的正確使用方法
更新時(shí)間:2023-06-15 點(diǎn)擊次數(shù):2153
垂直轉(zhuǎn)印電泳槽是一種常見(jiàn)的電泳設(shè)備,用于將蛋白質(zhì)、DNA、RNA等生物大分子的分離和鑒定。其工作原理是利用電場(chǎng)的作用,使帶電的生物大分子在凝膠介質(zhì)中向相反電荷的方向移動(dòng),從而達(dá)到分離的目的。
1、制膠:選擇所需間隔厚度的墊條玻璃板,玻璃板上標(biāo)記的箭頭方向向上,玻璃板上有墊條的那面面對(duì)操作者。薄玻璃板平行蓋在墊條上。將上述一套玻璃板垂直放入制膠支架,在平整的桌面上將墊條玻璃和薄玻璃的底面在制膠支架上的鎖緊門(mén)向二側(cè)旋轉(zhuǎn)鎖緊,完成一個(gè)制膠單元。將準(zhǔn)備好的制膠單元的底面壓到制膠固定架的密封相交條上,制膠支架的后邊盡量靠近制膠固定架,左手輕輕下壓墊條玻璃板上緣至制膠固定架的彈簧夾能卡住為止,右手調(diào)整彈簧夾,使彈簧夾能固定在墊條玻璃的中間位置。按要求調(diào)配合適濃度的膠灌入二塊玻璃板中間的間隙中至薄玻璃板上緣1mm處,插入對(duì)應(yīng)厚度和齒數(shù)的梳子,等待膠的凝固。
2、電泳槽準(zhǔn)備:將已制完的二組玻璃板分別裝入電極架的兩面,玻璃板的底部架在電極架的支腳上,薄玻璃的邊緣與電極架的紅色橡膠條緊貼。如僅走一塊膠,可用提供的玻璃替代塑料片裝在電極架的另一面。將裝完玻璃板的電極架插入垂直槽槽內(nèi)固定架,并確認(rèn)電極架已到底。再下壓已裝入的電極架的電極二邊外突部分,使玻璃底面與電極架支腳面分離。將垂直槽槽內(nèi)固定架上的鎖緊門(mén)向中間旋轉(zhuǎn)鎖緊。
3、電泳:在內(nèi)槽中加入電泳緩沖液,直至電泳液溢出到外槽中,外槽中電泳液高度約3—5cm。在梳井內(nèi)加樣,注意避免引入氣泡。蓋好上蓋。保證電極架的正負(fù)極與槽蓋的正負(fù)極始終相對(duì)應(yīng)。接通電泳儀,電壓推薦使用60V—200V。
總之,垂直轉(zhuǎn)印電泳槽是一種重要的生物分子分離和鑒定設(shè)備,使用時(shí)需要注意安全和準(zhǔn)確性等方面。只有正確地使用和維護(hù)設(shè)備,才能保證分離效果和延長(zhǎng)設(shè)備的使用壽命。