根據(jù)DNA擴(kuò)增的目的和檢測的標(biāo)準(zhǔn),
JS-G基因擴(kuò)增儀分為普通基因擴(kuò)增儀,梯度基因擴(kuò)增儀,原位基因擴(kuò)增儀,實(shí)時熒光定量基因擴(kuò)增儀四類,下面我們就來看下他們具體的特色:
1、普通的
JS-G基因擴(kuò)增儀:把一次PCR擴(kuò)增只能運(yùn)行一個特定退火溫度的PCR儀,叫傳統(tǒng)的PCR儀,也叫普通PCR儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運(yùn)行。主要是做簡單的,對目的基因退火溫度的擴(kuò)增。該儀器主要應(yīng)用于科研研究,教學(xué),醫(yī)學(xué)臨床,檢驗(yàn)檢疫等機(jī)構(gòu)。
2、梯度
JS-G基因擴(kuò)增儀:把一次性pcr擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度),通常12種溫度梯度,這樣的儀器就叫梯度PCR儀。因?yàn)楸粩U(kuò)增的不同DNA片段,其zui適退火溫度不同,通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增,從而一次性PCR擴(kuò)增,就可以篩選出表達(dá)量高的zui適退火溫度,進(jìn)行有效的擴(kuò)增。
3、原位
JS-G基因擴(kuò)增儀:用于從細(xì)胞內(nèi)靶DNA的定位分析的細(xì)胞內(nèi)基因擴(kuò)增儀,如病源基因在細(xì)胞的位置或目的基因在細(xì)胞內(nèi)的作用位置等。是保持細(xì)胞或組織的完整性,使PCR反應(yīng)體系滲透到組織和細(xì)胞中,在細(xì)胞的靶DNA所在的位置上進(jìn)行基因擴(kuò)增,不但可以檢測到靶DNA,又能標(biāo)出靶序列在細(xì)胞內(nèi)的位置,于分子和細(xì)胞水平上研究疾病的發(fā)病機(jī)理和臨床過程及病理的轉(zhuǎn)變有重大的實(shí)用價(jià)值。
4、實(shí)時熒光定量
JS-G基因擴(kuò)增儀:在普通PCR儀的基礎(chǔ)上增加一個熒光信號采集系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng),就成了熒光定量PCR儀。其PCR擴(kuò)增原理和普通PCR儀擴(kuò)增原理相同,只是PCR擴(kuò)增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進(jìn)行標(biāo)記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結(jié)合擴(kuò)增。擴(kuò)增的結(jié)果通過熒光信號采集系統(tǒng)實(shí)時采集信號連接輸送到計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)得出量化的實(shí)時結(jié)果輸出。把這PCR儀叫做實(shí)時熒光定量PCR儀。
JS-G基因擴(kuò)增儀的日常維護(hù)保養(yǎng)工作:
1、樣品池的清洗
先打開蓋子,然后用95%乙醇或10%清洗液浸泡樣品池5min,然后清洗被污染的孔;用微量移液器吸取液體,用棉簽吸干剩余液體,設(shè)定保持溫度為50℃的PCR程序并使之運(yùn)行,讓殘余液體揮發(fā)去除,一般5~10min即可。
2、熱蓋的清洗
對于熒光定量基因擴(kuò)增儀,當(dāng)有熒光污染出現(xiàn),而且這一污染并非來自樣品池時,或當(dāng)有污染或殘跡物影響到熱蓋的松緊時,需要用壓縮空氣或純水清洗墊蓋底面,確保樣品池的孔干凈,無污物阻擋光路。
3、儀器外表面的清洗
清洗
JS-G基因擴(kuò)增儀的外表面可以除去灰塵和油脂,但達(dá)不到消毒的效果,選擇沒有腐蝕性的清洗劑對基因擴(kuò)增儀的外表面進(jìn)行清洗。
4、更換保險(xiǎn)絲
先將基因擴(kuò)增儀關(guān)機(jī),拔去插頭,打開電源插口旁邊的保險(xiǎn)盒,換上備用的保險(xiǎn)絲,觀察是否恢復(fù)正常。